引言

  羅丹明B(Rhodamine B)又稱玫瑰紅B或鹼性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。實驗證明羅丹明B會致癌，現在已不允許用作食品染色。但是不法商販會利用消費者喜歡好賣相的心理，往花椒、辣椒、紅辣椒油、紅油豆製品等食品中添加羅丹明B來提高其紅豔度。

  經研究證明羅丹明B會直接危害到人體健康，具有潛在的致癌、致突變性和心臟毒性。想要用肉眼分辯出羅丹明B其實很難，常用檢測方式主要有GC和GC-MS聯用法。此檢測方式需要大型儀器設備，價格昂貴。使用拉曼光譜檢測方式在分析化學等很多領域中得到了很好的發展和應用。結合表面增強拉曼技術可以顯著提供高靈敏度,在食品安全和材料科學等領域已經得到了廣泛應用。本文中通過拉曼光譜法只需要簡單的樣品前處理，可以在十幾分鐘內得到食品中是否含有非法添加羅丹明B的檢測結果。
 

實驗部分

1. 實驗試劑
    工業色素羅丹明B1000ppm(mg/kg)、去離子水（二次蒸餾水）、增強試劑、促凝劑、乙腈、辣椒粉、乙腈

2. 實驗儀器
     EVA3000Plus、拉曼液體測量支架、超聲波萃取機、離心機（1萬轉）、移液槍（1-1000ul,1-100ul，1-200ul規格）

3. 儀器參數

4. 實驗方法
測試標準樣品：
    Step1、使用移液槍取1ul的羅丹明B 1000ppm，取999ul的二次水，獲得1ppm的羅丹明B標準樣品
    Step2、使用移液槍取試劑A（金膠）500ul至試劑瓶
    Step3、使用移液槍取羅丹明標準樣品50ul至試劑瓶
    Step4、使用移液槍取試劑B（促凝劑）100ul至試劑瓶，搖勻
    Step5、測試拉曼信號，設置200mw雷射器，積分時間5秒中
注意事項：測試前需要搖勻，並在2-3分鐘內完成樣品測試
 
測試實際樣品：
    Step1、取1g辣椒粉
    Step2、使用移液槍取50ppm羅丹明B100ul
    Step3、使用移液槍取100ul的乙腈稀釋(得到濃度為5ppm的陽性樣品)
    Step4、取3ml乙腈，搖勻後，超聲10分鐘，取上清液500ul

    Step5、取試劑A 100ul，離心機離心2分鐘，液固分離，取上清液
    Step6、使用移液槍取試劑A(金膠)500ul至試劑瓶
    Step7、使用移液槍取試劑樣本樣品50ul至試劑瓶
    Step8、使用移液槍取試劑B(促凝劑)100ul至試劑瓶，搖勻
    Step9、測試拉曼信號，設置200mw雷射器，積分時間5

結果與討論

  實驗測試了1ppm的標準樣品和5ppm的實際樣品資料如下圖所示，得到了羅丹明的表面增強後的拉曼光譜。下圖為辣椒實際樣品和標準樣品的拉曼表面增強拉曼光譜(光譜平滑、基線扣除、歸一化資料處理)：

  得到辣椒實際樣品和標準樣品的拉曼表面增強拉曼光譜的相似度為0.8868，從特徵峰來看，羅丹明的特徵峰被檢出，判斷為陽性樣品。